更新時(shí)間: | 2018-12-14 |
型 號(hào): | |
所屬分類(lèi): | 常用試劑 |
報(bào) 價(jià): | 700 |
T4 DNA連接酶—BR英文名: T4 DNA Ligase別名:CAS號(hào): 9015-85-4MDL: MFCD00163508
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | CAS號(hào) | 產(chǎn)品特征 |
Js10129-1ku | T4 DNA連接酶 | T4 DNA Ligase | 9015-85-4 | BR |
Js10128-1000u | T4 RNA連接酶 | T4 RNA Ligase |
| BR,10u/ul |
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T4 DNA連接酶—BR
英文名: T4 DNA Ligase
別名:
CAS號(hào): 9015-85-4
MDL: MFCD00163508
T4 DNA連接酶常用于催化雙鏈DNA平末端或互補(bǔ)粘性末端之間的連接反應(yīng),也能催化雙鏈RNA 5´ -磷酸末端和3´ -羥基末端間的連接。還可以修復(fù)雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA雜交雙鏈中的單鏈切口。以上反應(yīng)均需消耗ATP。 隨酶附帶10×T4 DNA Ligation Buffer及*配方的2×Quick Ligation Buffer提供給您更多的選擇:而使用10×T4 DNA Ligation Buffer,16℃過(guò)夜連接可獲得最高的連接效率;使用快連Buffer在室 溫(25℃)下,僅需5分鐘即可完成粘性末端或平滑末端DNA的片段的連接反應(yīng)。
使用建議:粘末端的連接反應(yīng):插入片段和載體的摩爾濃度比特別重要,此比例在2-6之間為好,低于2:1就會(huì)導(dǎo)致較低的連接效率,高于6:1則會(huì)導(dǎo)致多個(gè)插入。摩爾比請(qǐng)按載體與插入片段DNA濃度及分子大小來(lái)計(jì)算。
平滑末端的連接反應(yīng):平滑末端的連接反應(yīng)與突出末端相比反應(yīng)較慢(其Km值約為突出末端的100倍)。進(jìn)行平滑末端的連接反應(yīng)時(shí),可提高DNA濃度,將使用酶量增加到突出末端量的2~5倍左右。 向粘?;蚴删w進(jìn)行連接反應(yīng):可使載體和插入DNA的摩爾比調(diào)整為1:1,同時(shí)增大DNA濃度以便取得良好效果。(0.05~0.1μg/μl以上)
反應(yīng)溫度: 該酶的最適溫度為37℃,由于熱穩(wěn)定性較差,因此 長(zhǎng)時(shí)間反應(yīng)時(shí)通常需在16℃下進(jìn)行。若反應(yīng)1-2小時(shí)左右的話也可在室溫下進(jìn)行反應(yīng)。
抑制劑:T4 DNA連接酶要求Mg2+,因此螯合Mg2+的EDTA的存在會(huì)阻礙反應(yīng)。將溶解于含有高濃度EDTA緩沖液中的DNA準(zhǔn)備作為樣品使用 ,先用滅菌蒸餾水或TE緩沖液進(jìn)行置換。
儲(chǔ)存條件: -20℃
用途: DNA的片段和載體DNA的連接
【質(zhì)量承諾】: 非人為造成的產(chǎn)品質(zhì)量問(wèn)題,視具體情況,我司負(fù)責(zé)退貨換貨。