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CCK-8試劑盒實(shí)驗(yàn)原理和安全操作事項(xiàng)
點(diǎn)擊次數(shù):740 更新時(shí)間:2022-11-26
  CCK-8試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法。向預(yù)先包被了抗體的酶標(biāo)孔中加入樣本,再加入生物素標(biāo)記的識(shí)別抗原,在三十七度下孵育三十分鐘,兩者與固相抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合形成免疫復(fù)合物,經(jīng)PBST洗滌除去未結(jié)合的生物素抗原,然后加入親和素-HRP,親和素-HRP與生物素抗原結(jié)合,洗滌后結(jié)合的HRP催化TMB成藍(lán)色,隨后在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色,在一定波長下有吸收峰,吸光值與樣本中抗原的濃度成負(fù)相關(guān)。
  CCK-8試劑盒安全操作事項(xiàng):
  1、不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
  2、實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
  3、避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
  CCK-8試劑盒標(biāo)本收集需要注意的問題:
  1、收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原,無內(nèi)毒素試管。
  2、標(biāo)本應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。
  3、血清和血漿避免使用溶血,高血脂標(biāo)本。
  4、可根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際情況,做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議做預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定稀釋倍數(shù))。
  5、標(biāo)本收集后若不及時(shí)檢測(cè),需按一次使用量分裝, 凍存于二十度到零下八十度的電冰箱內(nèi),避免反復(fù)凍融。
  6、收集標(biāo)本時(shí),應(yīng)該做好防護(hù)措施(此如戴手套,護(hù)目鏡等),認(rèn)為所有標(biāo)本都具有一定的潛在危險(xiǎn)性。
  7、收集標(biāo)本,盡量做到雙份的用量,避免一次實(shí)驗(yàn)失敗,重復(fù)實(shí)驗(yàn)時(shí)標(biāo)本缺失,從而耽誤實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。
  8、樣本處理應(yīng)該在生物安全柜里面,并且正確使用生物安全柜。

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