五月激情综合,中文乱码字幕在线中文乱码,亚洲成AV人片天堂网无码,国产极品粉嫩馒头一线天AV

當(dāng)前位置:
首頁 > 技術(shù)文章 > 低轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞(MHCC97-L)培養(yǎng)說明書
目錄導(dǎo)航 Directory
技術(shù)支持Article
低轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞(MHCC97-L)培養(yǎng)說明書
點(diǎn)擊次數(shù):1827 更新時間:2019-01-08

                       低轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞(MHCC97-L)

貨號:HLCL-029

 

細(xì)胞介紹

該細(xì)胞來源于中山醫(yī)院,生長較緩慢。

 

細(xì)胞特性

1) 來源:

2) 形態(tài)上皮細(xì)胞,貼壁生長

3) 含量:>1x106 個/mL

4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性

5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

 

細(xì)胞接受后的處理:

1) 收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。

2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。

3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。

4) 如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。

5) 接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。

 

細(xì)胞用途:僅供科研使用。

                       

本公司細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考

一.培養(yǎng)基培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基(DMEM,GIBCO,貨號11995-065),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)。液氮儲存。

二. 細(xì)胞處理

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子PBS潤洗細(xì)胞1-2。

2. 加2ml消化液0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。

3. 輕輕打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)

3)細(xì)胞凍存:細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,先要消化處理并進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3驟進(jìn)行,后的重懸液使用血清。懸浮細(xì)胞直接計數(shù)后離心,用血清重懸浮DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106細(xì)胞凍存。

 

注意事項(xiàng):

1. 收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系

2. 所有動物細(xì)胞均視為潛在的生物危害性,必須在二級生物安全內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

 

神經(jīng)HRP示蹤顯色液(TMB 法)說明書

人絨毛膜癌細(xì)胞(JEG-3)培養(yǎng)說明書

小鼠成纖維細(xì)胞(L-929)培養(yǎng)說明書

滬公網(wǎng)安備 31011802001678號

一区二区三区在线观看视频| 免费a级毛片无码免费视频120软件| freexxx性欧美另类极品| 亚洲精品乱码在线观看| 国内精品久久久久电影院| 亚洲AV中文无码字幕色最| 国产精品一区二区不卡| 大香蕉综合| 久久九九精品99国产精品| 亚洲av无码一区二区三区天堂| 天堂网站| 久久射| 欧美一级特黄aaaaa片大水| 国产成人香蕉久久久久| 久久精品国产男包| 中文字幕久久波多野结衣av不卡| 亚洲精品一区二三区| maturewomen熟妇乱| 日韩1区2区3区| 18禁黄网站禁片免费观看| 日本少妇毛茸茸高潮| 一区二区三区国产精品保安| 尖峰时刻2| 视频人妖一区二区| 久久水蜜桃亚洲AV无码精品| 99久久免费视频播放99| 国产成人精品一区二区三区免费| 日韩亚洲变态另类中文| 正妻| 人妻三级日本香港三级极97| 国产成人精品亚洲精品| 国产精品怡红院在线观看| 久久久久亚洲AV成人网人人软件| 青青青国产在线视频在线观看| 天堂色av| 就爱av| 粉嫩的逼| 国产一区二区不卡| 欧洲精品成人免费视频在线观看| 国产日产欧洲无码视频无遮挡 | 最近最新中文字幕视频|